產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品內(nèi)容
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規(guī)格 組分 |
C6034S (20T) |
C6034L (500T) |
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A. CFDA SE |
1管 |
1管× 5 |
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B. CFDA SE溶劑 |
20 μL |
500 μL |
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C. 10× CFDA SE Buffer |
1 mL ×2 |
50 mL |
儲存條件
-20℃避光保存，有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于CFDA SE對細胞進行增殖及示蹤檢測的試劑盒，本試劑盒由CFDA SE粉末、溶劑及染色緩沖液組成。
CFDA SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具有細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當CFDA SE穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基共價結合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上。同時，過量且未被偶聯(lián)的CFDA SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。
CFDA SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也很均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。CFDA SE可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng)CFDA SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA SE最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，NK細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA SE標記細胞呈綠色熒光，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
注意事項
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底，再進行后續(xù)實驗。
3. CFDA SE溶劑在4oC、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25oC水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
4. 本試劑盒對CFDA SE染色體系做了優(yōu)化處理，但建議使用者根據(jù)自身的細胞類型，培養(yǎng)條件以及應用方向來梯度摸索最佳的工作濃度及染色時間。不同的細胞其細胞內(nèi)酯酶活性不同，因此染色效果具有差異性。
5. 熒光染料均存在淬滅問題，操作過程中請注意避光，以減緩熒光淬滅。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答：
◆CFDA SE細胞標記液的配制是必須用純水，還是用PBS就可以？
必須用細胞培養(yǎng)級純水
◆能否用于干細胞的增殖檢測？
CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒可以用于各種常見細胞的增殖和示蹤檢測，包括干細胞、神經(jīng)細胞等
◆您好，我用肝素全血做淋轉，可以用這個標記嗎？具體步驟跟這個一樣嗎？
肝素全血做淋轉相關實驗建議老師參考文獻資料確定，這邊暫時沒有相關步驟提供給您的，目前該探針主要用于細胞增殖的標記
◆嘗試在懸浮狀態(tài)下標記細胞，并通過CFDA SE標記來追蹤它們，但標記后它們將不再粘附在表面上（而未標記的細胞粘附良好），試過在10和20μM處標記，這是什么原因造成的？
這種染料將通過伯胺與蛋白質(zhì)結合，濃度過高會導致細胞毒性或細胞功能的意外改變。解決方案是減少濃度或染色時間，或使用非蛋白結合追蹤試劑
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